Bioquímica: Técnica Espectrofotometria.

Curso: Farmácia	Data da aula: 11/ 10/2017
Disciplina: Bioquímica	Período:   2º
Docente: Thiago Kastell Mazeto
Acadêmicos:	Hediley de Oliveira Gonçalves
Josimar Bispo Amaral
Kamila Zanati Dantas
Leila Serviuc Danas
Mariana da Silva Pereira

1 – TÍTULO:

 Técnica espectrofotometria.  

2 – INTRODUÇÃO: 

A espectrofotometria é um método que estuda a interação da luz com a matéria e a partir desse princípio permite a realização diversas análises. Cada composto químico absorve, transmite ou reflete luz ao longo de um determinado intervalo de comprimento de onda. A espectrofotometria pode ser utilizada identificar e quantificar substâncias químicas a partir da medição da absorção e transmissão de luz que passa através da amostra.

[pic 2]

Disponível em  www.ufjf.br/quimica/files/2016/08/Espectrometria-UV-vis.pdf

A luz infravermelha apresenta-se inferior a 300nm enquanto a ultravioleta superior a 750nm.

 [pic 3] 

Disponível em  www.ufjf.br/quimica/files/2016/08/Espectrometria-UV-vis.pdf

O objetivo da aula foi nos apresentar o método utilizado para realização de determinados exames, como glicose, triglicerídeo e colesterol. Onde uma amostra coletada é colocada dentro do espectrofotômetro, o comprimento de onda da luz do dispositivo chamado monocromador atinge a amostra, e a luz que passa através da amostra é lida pelo detector. 

3 – PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL:

Materiais utilizados

• Espectrofotômetro
• Cubeta
• H2o
• Solução

Em uma solução padrão a concentração do colesterol 200mg/dl possui absorbância em 0,400 e o elemento desconhecido a absorbância em 0,240. Desta forma, o procedimento consiste na utilização do espectrofotômetro na obtenção de resultados.

Procedimento:

Adicionar a solução em uma cubeta e uma amostra de H2o em outra, em seguida inserir no espectrofotômetro e zera-lo na primeira amostra contendo água, alterar para a segunda amostra (solução) e ajustar os nm observando os resultados.

 

4 – RESULTADOS E CONCLUSÕES: 

Colesterol padrão 200mg/dl            Corante padrão 5mg/dl

5mg/dl         0,050     ?                0,033 ?: 3,3mg/dl

200mg/dl            0,400        ?                    0,240 ?: 120mg/dl

 

Dados coletados a partir do espectrofotômetro  

320 nm	-
350 nm	-
400 nm	-
420 nm	0,050	0,003
450 nm	0,059	0,001
500 nm	-
550 nm	-
610 nm	-
650 nm	-
700 nm	-

Através do experimento foi possível confirmar a tese de que um elemento escuro possui maior absorbância do que um elemento claro ao compararmos as amostras. Um exemplo a ser citado é o caso da agua que é utilizada como ponteiro para zerar o espectrofotômetro por justamente possuir a absorbância 0.